細(xì)胞毒性實驗

簡要描述：細(xì)胞毒性實驗：細(xì)胞毒性（cytotoxic）是由細(xì)胞或化學(xué)物質(zhì)引起的單純細(xì)胞殺傷事件，不依賴于凋亡或壞死的細(xì)胞死亡機理。有時需要進行特定物質(zhì)細(xì)胞毒性的檢測，比如藥物篩選。

更新時間：2022-12-23
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細(xì)胞毒性檢測主要是根據(jù)細(xì)胞膜通透性發(fā)生改變來進行的檢測，常用以下幾種方法：
MTT、XTT法：利用線粒體內(nèi)部酶的活性，可以將特定的四唑鹽類進行轉(zhuǎn)化，然后通過酶標(biāo)儀進行檢測
LDH的方法：通過檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清中LDH的酶活性，來檢測細(xì)胞毒性
其它酶方法：如檢測上清中堿性磷酸酶、酸性磷酸酶的活性等
細(xì)胞增殖能力分析試劑盒
原理：正常細(xì)胞代謝旺盛，其線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶，可將四唑鹽類物質(zhì)（如 MTT、XTT、WST-1等）還原為紫色的結(jié)晶狀的物質(zhì)，沉積在細(xì)胞周圍，然后通過酶標(biāo)儀讀取OD值，從而檢測到細(xì)胞增值狀態(tài)
熒光素發(fā)光法細(xì)胞生存能力檢測
原理：腺苷酸激酶（AK）存在于所有真核和原核細(xì)胞的胞漿中，AK具有激活A(yù)DP生成ATP。當(dāng)細(xì)胞受損后，細(xì)胞膜發(fā)生破損，AK會釋放到培養(yǎng)上清中。該試劑盒利用熒光素酶和熒光素在ATP作用下可以發(fā)光，通過化學(xué)發(fā)光儀可以定量進行檢測。
LDH法細(xì)胞毒性檢測
原理：LDH（乳酸脫氫酶）是一種穩(wěn)定的蛋白質(zhì)，存在于正常細(xì)胞的胞質(zhì)中，一旦細(xì)胞膜受損，LDH即被釋放到細(xì)胞外； LDH催化乳酸形成丙酮酸鹽，和INT（四唑鹽類）反應(yīng)形成紫色的結(jié)晶物質(zhì)，可通過500nm酶標(biāo)儀進行檢測。通過檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清中LDH的活性，可判斷細(xì)胞受損的程度

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